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離子對試劑知多少?

更新時間:2023-04-25 點擊次數(shù):1087

哈嘍,相信有實驗經(jīng)驗的小伙伴,對于“離子對試劑"這個名詞并不陌生,因為在我們?nèi)粘z測中會經(jīng)常出現(xiàn)它們的身影,它們也實實在在幫助我們在日常檢測中,解決了很多棘手的問題。下面小編就簡單帶大家認(rèn)識下這位日常檢測幫助良多的“大功臣"。


01



原理

使用液相色譜法分析電離能力比較強的樣品時,樣品在反相色譜柱上的保留時間很短或者根本不保留,這時要加入相應(yīng)的離子對試劑,將分析物上的離子進(jìn)行結(jié)合,形成在柱子上有保留的分子。

02



離子對試劑種類

離子對試劑的種類濃度對分離效果都有較大的影響。離子對試劑種類的選擇依賴于被分離樣品的性質(zhì)。

 被分離溶質(zhì)是強酸或強堿,離子對試劑可以是強酸或強堿,弱堿或弱酸。

 被分離的溶質(zhì)是弱酸或弱堿,則選用的離子對試劑必須是強堿或強酸。

 對于溶質(zhì)結(jié)構(gòu)性質(zhì)相差較大的混合樣品,離子對試劑種類的選擇并沒有特殊要求。

 離子對試劑疏水性的差別可以通過調(diào)節(jié)離子對試劑濃度和有機(jī)溶劑濃度獲得滿意的分離效果。

1. 用于酸性化合物:四丁基氫氧化銨(10%水溶液) 、四丁基溴化銨、十二烷基三甲基氯化銨。

2. 用于堿性化合物:戊烷磺酸鈉、己烷磺酸鈉 、庚烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、癸烷磺酸鈉。

3. 其他離子對試劑:高氯酸鈉、三氟yi酸、七氟丁酸等。

常用離子對試劑 CAS號:

1-戊烷磺酸鈉 CAS:22767-49-3

1-己烷磺酸鈉 CAS:2832-45-3

1-庚烷磺酸鈉 CAS:22767-50-6

1-辛烷磺酸鈉 CAS:5324-84-5

1-癸烷磺酸鈉 CAS:13419-61-9

03



離子對試劑選用步驟

1.選擇一根適合的色譜柱,常為C18柱。

2.準(zhǔn)備流動相時僅使用HPLC級別的水和色譜級試劑。

3.選擇能給出最佳分離度的流動相成分和濃度。

4.如果樣品中有非離子化物質(zhì),在嘗試離子化分離之前首先優(yōu)化分離情況。

5.選擇合適的離子對系列試劑以提供相應(yīng)的離子配對:對于酸性分析物使用酸性離子對試劑;對于堿性分析物使用堿性離子對試劑。

6.通過比較選擇所得分離度zui 好的離子對試劑。

7.一旦離子對試劑已經(jīng)確定,調(diào)節(jié)流動相的pH值將分離度zui大化;因為微小的pH值改變對保留性質(zhì)和選擇性都有較大的影響,所以仔細(xì)的小幅度調(diào)節(jié)pH值。

8.理想狀況下,流動相中的離子對試劑濃度應(yīng)為0.005M,但是稍微增加離子對試劑可能會稍微增加保留性質(zhì)并因此優(yōu)化分離情況。




優(yōu)點

1.緩沖液制備簡單。

2.使用反相色譜柱,碳鏈長度選擇眾多,可用于增加保留時間、改善分離性質(zhì)。

3.即使使用較大離子,也能得到清晰的峰形且保持結(jié)果高度重現(xiàn)性。

4.分離時間縮短(與離子交換相比)。

5.適用于復(fù)雜混合物的分離(不同于離子抑制法)。

6.能夠同時分離離子化和非離子化的分析物。

7.有效改善峰形。




缺點

1.對色譜柱傷害較大。離子對試劑會對色譜柱造成不可逆的傷害,離子對試劑和固定相結(jié)合產(chǎn)生不可逆吸附,進(jìn)而影響固定相活性位點。比如十八烷基硅膠鍵合色譜柱,這種反應(yīng)對色譜柱影響很大,而且離子對試劑很難從色譜柱上沖洗干凈,會大大縮短色譜柱的使用壽命。

2.實驗條件不穩(wěn)定。離子對試劑的濃度與其樣品的保留時間有直接的影響,而且離子對試劑對pH值比較敏感,配制流動相時要求精確度較高。否則直接影響實驗的重復(fù)性和重現(xiàn)性。

3.用離子對試劑的實驗色譜柱平衡時間較長,一般都建議小流速過夜平衡。

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