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遇到前沿峰,該怎么辦?

更新時(shí)間:2023-04-25 點(diǎn)擊次數(shù):1099

前沿平緩,后沿陡峭的不對稱色譜峰稱前沿峰。當(dāng)色譜峰的對稱因子在0.95~1.05為正常峰;小于0.95為前沿峰;大于1.05為拖尾峰。一般情況下,0.9~1.2的色譜峰均可被接受。

在日常的液相色譜分析過程中,前沿峰也是我們經(jīng)常遇到的色譜圖問題。那今天我們就來學(xué)習(xí)下,前沿峰的緣由以及該如何應(yīng)對。

01前沿峰的影響

影響峰高的計(jì)算

峰面積相同情況下,由于峰前沿,它們的峰高會(huì)相差很多。當(dāng)我們使用峰高來計(jì)算樣品結(jié)果時(shí)就產(chǎn)生影響,尤其是計(jì)算zui低檢出xian時(shí)會(huì)比較明顯。

影響峰面積的計(jì)算

當(dāng)計(jì)算峰面積時(shí),峰的起點(diǎn)和終點(diǎn)一般通過色譜峰的斜率來確定。色譜峰前沿,它的前部基線越平緩起點(diǎn)就越難確認(rèn),導(dǎo)致峰面積定量不準(zhǔn)。

影響對某些痕量組分的確認(rèn)

當(dāng)前面的峰分離度不是很好時(shí),樣品峰就會(huì)容易被隱藏在后面峰的前沿處從而無法計(jì)算。

02前沿峰原因分析及解決方案

柱過載

每一根色譜柱都有其最大樣品承載量,當(dāng)樣品量過多時(shí)會(huì)出現(xiàn)超載現(xiàn)象,包括質(zhì)量過載和體積過載。我們可通過降低樣品量或者樣品濃度來看峰形是否有所改善。也可增加柱直徑,采用較高容量的固定相來解決。

樣品溶劑選擇不恰當(dāng)

當(dāng)樣品溶劑的洗脫能力大大強(qiáng)于流動(dòng)相時(shí)會(huì)出現(xiàn)前沿峰。具體就是說,樣品在色譜柱中均勻的往前移,我們通常會(huì)得到呈正態(tài)分布的峰。當(dāng)樣品溶液進(jìn)樣后到達(dá)色譜柱的時(shí)間比較短,在未被流動(dòng)相充分稀釋時(shí),由于洗脫能力比較強(qiáng)的樣品溶劑存在,使部分樣品被洗脫的速度加快,快速通過色譜柱,最終導(dǎo)致峰前延。例如,在反相色譜中用乙腈做樣品溶劑,如果流動(dòng)相的洗脫力較弱時(shí)就會(huì)出現(xiàn)前沿峰。我們可以選擇流動(dòng)相或者接近流動(dòng)相的比例的試劑作為樣品溶劑。

色譜柱損壞

色譜柱在長時(shí)間使用之后就會(huì)導(dǎo)致硅膠填料的溶解,柱床崩解,從而柱效降低導(dǎo)致峰前沿。如果排查出是色譜柱損壞,建議直接更換色譜柱。

峰干擾

兩個(gè)化合物共洗脫,即在大峰前有小峰出現(xiàn),色譜峰沒有分開??赏ㄟ^增加樣品凈化程序,減少干擾。也可調(diào)整流動(dòng)相提高分離度。

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