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峰前沿3大影響,4招幫你解決!

更新時(shí)間:2023-03-10 點(diǎn)擊次數(shù):2397

在日常的液相色譜分析過程中,前沿峰也是我們經(jīng)常遇到的色譜峰異常問題。前沿較后沿平緩的不對稱的峰叫前沿峰。

640.png

在液相色譜中,拖尾因子的計(jì)算公式是:

640 (5).png

T代表:峰的不對稱性或者拖尾因子;

W0.05代表:從離基線的距離為峰高5%的點(diǎn)測量到的峰前緣到尾緣的距離;

f代表:從峰最大值到位于5%峰高處的峰前緣的距離;

當(dāng)T<0.95時(shí),是前沿峰。

今天小編和大家討論下,峰前沿的影響以及該如何應(yīng)對。

問:日常測試中,出現(xiàn)前沿峰,對分析結(jié)果有哪些影響呢?

1、影響峰高的計(jì)算

在峰面積相同情況下,前沿峰的峰高會(huì)相差很多。當(dāng)使用峰高來計(jì)算樣品結(jié)果時(shí)就產(chǎn)生影響,尤其是計(jì)算zui低檢出xian時(shí)比較明顯。

2、影響峰面積的計(jì)算

當(dāng)計(jì)算峰面積時(shí),峰的起點(diǎn)和終點(diǎn)一般通過色譜峰的斜率來確定。色譜峰前沿,前端基線越平緩,峰起點(diǎn)就越難確認(rèn),導(dǎo)致峰面積定量不準(zhǔn)。

3、影響對某些痕量組分的確認(rèn)

當(dāng)前后兩個(gè)峰的分離度不好時(shí),如果后一個(gè)峰有前沿,前一個(gè)峰容易被包裹在后一個(gè)峰的前沿處從而無法計(jì)算。

問:導(dǎo)致前沿峰出現(xiàn)的原因有哪些,該怎么解決呢?

1、柱過載

每一根色譜柱都有其最大樣品承載量,當(dāng)樣品量過大時(shí),則會(huì)出現(xiàn)超載現(xiàn)象,包括質(zhì)量過載和體積過載。通??赏ㄟ^降低樣品量或者樣品濃度來看峰型是否有所改善。也可增加柱直徑,或采用較高容量的固定相來解決。

2、樣品溶劑選擇不恰當(dāng)

當(dāng)樣品溶劑的洗脫能力強(qiáng)于流動(dòng)相時(shí)會(huì)出現(xiàn)前沿峰。具體就是說,樣品在色譜柱中均勻的往前移,會(huì)得到呈正態(tài)分布的峰。當(dāng)樣品溶液進(jìn)樣后到達(dá)色譜柱的時(shí)間比較短,而未被流動(dòng)相充分稀釋時(shí),由于有洗脫能力比較強(qiáng)的樣品溶劑存在,使部分樣品被洗脫的速度加快,快速通過色譜柱,最終導(dǎo)致峰前沿。例如,在反相色譜中用純乙腈做樣品溶劑,如果使用的流動(dòng)相的洗脫能力比純乙腈弱,就會(huì)出現(xiàn)前沿峰。通常可以選擇用流動(dòng)相或者和流動(dòng)相比例的接近的試劑作為樣品溶劑。

3、色譜柱損壞

色譜柱在長時(shí)間使用之后會(huì)導(dǎo)致硅膠填料的溶解,柱床崩解,從而柱效降低導(dǎo)致峰前沿。如果排查出是色譜柱損壞,建議直接更換色譜柱。

4、峰干擾

兩個(gè)化合物共洗脫,即在大峰前有小峰出現(xiàn),色譜峰沒有分開??赏ㄟ^增加樣品凈化程序,減少干擾。也可調(diào)整流動(dòng)相比例提高分離度。

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