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Flash柱的固體上樣,如何選擇合適的方法

更新時間:2022-08-05 點擊次數(shù):1046

Flash柱已經(jīng)成為天然產(chǎn)物粗品純化或者有機合成反應(yīng)體系純化時zui常用的工具之一。而當各位小伙伴在深入了解了Flash柱的純化方式后又會發(fā)現(xiàn),樣品的上樣方式是影響分離效果的重要因素之一。

在Flash色譜中,樣品可以通過兩種不同的方式上樣:固體或液體。液體上樣,是將樣品溶解在溶劑中后,直接注入Flash柱上。固體上樣,是將粗樣品與載體材料(如硅膠)的固體均勻混合物放在Flash柱前面。


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我們該如何選擇合適的上樣方法

當樣品若單次進樣量少且在流動相中易溶解時通常我們會選擇液體上樣的方法。采用液體上樣時主要考慮的因素有:

化合物在初始溶劑中的溶解度:樣品需要*溶解。

溶解溶劑的極性:通常正相柱多采用弱極性溶劑,反相柱采用極性溶劑。

樣品溶劑的體積:理想的樣品體積不應(yīng)超過Flash柱體積的10%。

樣品量:每根色譜柱都有規(guī)定的上樣量。理想的樣品量不應(yīng)超過Flash柱的最大上樣量。


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那么當我們遇到進樣的樣品量較大的時候,或用于分離具有難以溶解的粘性或多雜質(zhì)樣品,就需要考慮采用固體上樣了。固體上樣通常通過以下步驟完成:


將粗樣品溶解在合適的溶劑中。

然后,將該混合物在超聲浴中超聲幾分鐘,以提高溶解度。

過濾混合物以除去尚未*溶解的物質(zhì)。

將硅膠以粗樣品重量的2-3倍添加到上述混合物中。

溶劑通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀*地減壓蒸餾干。

最后,將粗樣品和硅膠的混合物裝入固體裝樣器或者空柱管中,然后將其安裝在Flash柱的上面。連接溶劑洗脫流路。

待分離的組分不斷地從固體裝樣器中洗脫到實際分離Flash柱中。

固體上樣可以有效減輕純化時拖尾的情況,尤其是在洗脫體系或其他弱極性溶劑中溶解度較小的樣品,能夠得到較窄的色帶和峰形,且上樣時平鋪均勻,樣品色帶下降時也會平整。

盡管液體上樣簡單方便,固體上樣相對繁瑣一些,但當您遇到樣品峰型不理想的時候,固體上樣往往能提高柱效以及樣品純度。


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