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保留時(shí)間漂移的影響因素不僅僅是流動(dòng)相

更新時(shí)間:2021-12-29 點(diǎn)擊次數(shù):2140

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我們在做液相色譜的時(shí)候,多多少少都會(huì)碰到一些問題,比如:峰保留時(shí)間漂移。這是個(gè)令人頭疼的問題,引起峰保留時(shí)間漂移的因素有很多,比如流動(dòng)相是否充分平衡、流動(dòng)相體系和固定相的選擇是否合適、是否存在溶劑效應(yīng)等,當(dāng)排除這些影響,而問題依然存在的情況下,該如何解決呢?

來看一個(gè)案例:

枸櫞酸類化合物,易溶于水,在反相C18柱上以酸性體系作流動(dòng)相,峰保留及峰型情況良好,但隨著進(jìn)樣次數(shù)的增多,峰保留時(shí)間呈不斷前移狀態(tài)。


如圖1所示:


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調(diào)整流動(dòng)相及更換色譜柱,該現(xiàn)象依然存在


如圖2所示:


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調(diào)整流動(dòng)相,更換色譜柱,問題依然存在,說明導(dǎo)致該現(xiàn)象的產(chǎn)生并非因?yàn)榱鲃?dòng)相體系或色譜柱原因造成,初步推斷問題出自樣品本身。

分析該物質(zhì)結(jié)構(gòu),為酸性化合物,以水作為它的溶樣溶劑時(shí),無法很好的保持它的分子狀態(tài),因?yàn)樗膒H值偏中性,甚至是偏弱堿性,在這樣的環(huán)境下,化合物中的生色團(tuán)受到與其相連的分子中其他部分的影響以及溶劑的影響,使得它的吸收峰位置發(fā)生移動(dòng),導(dǎo)致樣品溶解后的狀態(tài)不夠穩(wěn)定,故我們需要改善它的溶液穩(wěn)定性。

以流動(dòng)相(pH3.0)做溶樣溶劑,峰保留時(shí)間漂移問題有改善,但效果還不夠理想。


如圖3所示:


微信截圖_20211229135409.png

改用磷酸水(pH2.0)作溶樣溶劑,

峰保留時(shí)間漂移問題得以解決。


如圖4所示:


微信截圖_20211229135440.png

 結(jié)論


1

峰保留時(shí)間的影響因素不僅僅是流動(dòng)相、固定相等,當(dāng)這些外在的影響因素排除后,仍然存在RT漂移問題,可從樣品自身角度出發(fā)考慮問題。

2

樣品溶解后的狀態(tài),關(guān)乎到樣品的保留時(shí)間、峰面積的穩(wěn)定性及峰型是否良好等問題,溶劑選擇的時(shí)候,需充分考慮這方面的因素。



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