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如何正確使用BC-10脫鹽柱

更新時間:2021-11-19 點擊次數(shù):4312

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雖然我們都認為,唯有天才方能造出偉大的作品,但今天我想說,無名的工人同樣能夠制造出毫不遜色的杰作。


工作原理

利用具有網(wǎng)狀結(jié)構的葡聚糖凝膠的分子篩作用,根據(jù)被分離物質(zhì)的分子大小不同來進行分離。層析時,大于凝膠孔徑的大分子,被阻于凝膠相外,沿著凝膠顆粒之間的間隙走,下移速度最快,故最先洗脫下來,中分子物質(zhì)部分進入凝膠內(nèi)部,洗脫速度為其次,而小分子物質(zhì)因全部進入凝膠,受到阻力最大,故最后被洗脫下來,如此物質(zhì)得到分離。


技術參數(shù)


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特點


1.分辨率高,流速適中,易收集,耐酸耐堿耐高溫,具有良好的穩(wěn)定性;

2.一般生物大分子的分子量比鹽等小分子大許多倍,用凝膠過濾方法為生物產(chǎn)品脫鹽十分簡單、可靠。


應用

用于純化分子量大于5,000 Da的蛋白質(zhì)分子或替換成所需的緩沖液。


操作步驟

1.平衡:打開上下蓋帽,柱里的保護液自然滴落,繼續(xù)加入緩沖溶液,邊滴邊加,至少加3倍柱體積用來清除層析柱中的保護液。

2.進樣:BC-10脫鹽柱的最大進樣體積為2mL,樣品體積不足時,可以在樣品*進入柱床體積后添加緩沖液到總體積2mL。為了增長填料的使用壽命,所用的樣品推薦使用0.45微米的濾膜過濾。

3.洗脫:繼續(xù)加入緩沖液進行洗脫。


再生保存步驟

——該層析柱雖是一次性使用,但是也可以重復再生使用。

 1.去離子水洗5個柱體積;

 2.0.5M氫氧化鈉清洗2-3柱體積;

 3.去離子水清洗3個柱體積;

 4.再用20%乙醇洗柱5個柱體積。


訂貨信息


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