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5種類胡蘿卜素天然營養(yǎng)物質的高效液相色譜的分離測定

更新時間:2020-11-11 點擊次數(shù):3377

 

背景

 

葉黃素、玉米黃質、α-胡蘿卜素、β-胡蘿卜素和番茄紅素是天然植物性食品中Z為常見的5種類胡蘿卜素類營養(yǎng)物質,具有維生素A原活性、抗氧化、參與細胞傳遞、免疫功能調節(jié)與促進、保護皮膚免于紫外線傷害和抑制黃褐斑生成等諸多生理保健功效。

 

但這5種類胡蘿卜素類營養(yǎng)物質的液相色譜同時分離測定一直比較困難,原因是這5種類胡蘿卜素類營養(yǎng)物質之間的極性差異比較大,葉黃素和玉米黃質分子結構中有兩個羥基,極性較強,在反相液相色譜柱(如C18等)上的保留力較弱,而α-胡蘿卜素、β-胡蘿卜素和番茄紅素是烴類物質,僅由碳和氫兩種原子構成,無任何極性官能基團,極性極弱,在反相液相色譜柱(如C18等)上的保留力*;另外,更為重要是葉黃素和玉米黃質之間,以及α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素之間,兩兩互為同分異構體,相互間僅是一個碳-碳雙鍵的位置差異,液相分離難度大(分子結構詳見附錄A,特征吸收光譜圖詳見附錄B)。

本應用案例采用月旭科技公司生產的C30反相高效液相色譜柱、兩元梯度洗脫,實現(xiàn)了單次高效液相色譜檢測對葉黃素、玉米黃質、α-胡蘿卜素、β-胡蘿卜素和番茄紅素這5種類胡蘿卜素類營養(yǎng)物質的分離檢測,且單次高效液相色譜檢測費時為35分鐘。

 

高效液相色譜檢測條件

 

1 儀器設備

Welch 高效液相色譜儀,WiSys5000,配備二級管陣列檢測器;

2 液相色譜柱

分析柱:Ultimate XB-C30色譜柱,4.6mm×250mm, 5μm;

保護柱:Ultimate XB-C30,4.6mm×10mm, 5μm;

3 流動相

A相:甲醇:乙腈=1:1;B相:乙酸乙酯;

4 梯度洗脫程序

 

5 流速

1.0mL/min;

6 檢測波長

476nm;

7 柱溫

30℃;

8 進樣體積

20μL。

 

高效液相分離色譜圖

 

 

從高效液相檢測的色譜圖看,不僅單次檢測,35分鐘內實現(xiàn)同時分離檢測葉黃素、玉米黃質、α-胡蘿卜素、β-胡蘿卜素和番茄紅素這5種類胡蘿卜素類營養(yǎng)物質,而且互為同分異構體的葉黃素和玉米黃質之間,以及α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素之間,都基本實現(xiàn)了基線分離。

 

相關色譜耗材 

 

附錄A:5種類胡蘿卜素天然營養(yǎng)物質的分子結構

 

 

 

附錄A:5種類胡蘿卜素天然營養(yǎng)物質的分子結構

 

 

 

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